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Onelife Exo-Alp PCR纯化试剂(平替ExoSAP-IT PCR)
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平替ABI ExoSAP-IT™ PCR 产物纯化试剂盒,ABI货号:78205.10.ML;78202.4X.1.ML;78201.1.ML;78200.200.UL。 Onelife Exo-Alp PCR纯化试剂用于扩增 PCR 产物的酶促纯化。能在单一步骤中水解过量的引物和核苷酸。一步解决方案能以简单的方式对 PCR 反应进行酶促纯化,有助于降低交叉污染的可能性。反应构建仅需一个移液步骤即可完成,其后紧接着是两次孵育。第一次孵育可以消化过量的引物并使核苷酸去磷酸化。第二次高温孵育可以使酶失活。引物和 dNTP 将不会再干扰 DNA 测序和 SNP 分析。 通过降解PCR引物和在完成的PCR反应中去磷酸化dNTP来清理PCR产物,这种酶已被广泛应用于现代分子生物学中不同领域,例如应用于Sanger测序中质粒模板的扩增,用于二代测序中的病毒基因组测序,单核苷酸多态性(SNP)分析,基因分型和全基因组扩增、产物的酶促纯化。 与使用旋转柱或磁珠的其他纯化方法相比,这种用于PCR产物净化的酶法具有以下优点: 1、在同一个PCR反应管中清理,不转移样品; 2、最少的动手时间,只需添加产品; 3、没有洗涤或洗脱的多个步骤,因此没有DNA损失。 Onelife Exo-Alp PCR纯化试剂用于在 30 分钟内通过降解引物和从 dNTP 中去除磷酸基团。消除了下游循环测序反应中残留 PCR 引物和 dNTP 的干扰,从而产生更清洁的测序背景和更好的峰分离。清洗后的PCR产物可直接用于下游循环测序,无需进一步纯化。除了Sanger测序应用外,该产品还可以用于清洁PCR 产物的单核苷酸多态性 (SNP) 和下一代测序 (NGS)。Onelife Exo-Alp PCR纯化试剂与常见的 PCR 纯化方法(如离心柱和磁珠纯化方法)相比,使用酶促反应来纯化 PCR反应。该净化方法需要很少的手动操作时间,并且消除了其他方法中多次洗涤造成的样品损失。 PCR产物清洗方案 1.为Sanger测序或其他应用进行PCR反应 2.以1,000rpm的速度将96孔PCR板离心10至15秒。 3.将5μL每个 PCR 产物转移到另一个96孔板中。 4.每孔加入2μL的Onelife Exo-Alp PCR纯化试剂。 5.密封板并涡旋2至3秒,然后按上述方法离心。 6.在37℃的热循环仪中孵育15分钟,然后在80度热灭活15分钟。 7.如上所述再次离心板,PCR产物准备好用于下游应用程序。 |
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