Onelife 31毛细管再生试剂盒

                                  PRODUCT INFORMATION SHEET

Onelife 31毛细管再生试剂盒操作手册

适用于进口ABI3130/3100系列

国产GA118系列、溯远1816系列基因分析仪

4道、16道，36cm、50cm毛细管

产品货号：1505280

一、产品规格：

7ml×4瓶 （包含：Buffer 1，Buffer 2，Buffer 3，Buffer 4）。

二、前言：

万莱福生物技术（深圳）有限责任公司研发生产的Onelife 31毛细管再生试剂盒产品，是为客户提供了一种在快速简便的工作流程中完全恢复故障毛细管分辨率的方法。它可以使贵单位设备上的旧毛细管恢复活力，延长毛细管使用寿命，降低设备运行成本。

三、用途：

该试剂盒可用于进口3130、3100系列、国产GA118系列、溯远1816系列基因分析仪配套适用的36cm、50cm毛细管。由于其毛细管随着运行次数增加，毛细管运行寿命到期后常见的问题：

l 片段分析中长片段信号（多数）短片段（少数）报错标红，宽峰、拖尾、出锋幅值低等。

l 测序电泳图谱中有效读长变短（小于700bp），Raw原始峰图出锋幅值低，有效数据中报错标红点位增多。

                                          出锋拖尾                                                                                    宽峰+出锋幅值低

短片段正常，长片段宽峰

测序有效读长变短

四、毛细管是适用再生清洗的前提条件：

1. 毛细管没有出现物理性的损坏。

2. 毛细管空间定位数据出锋必须正常。

3. 毛细管每个通道出水正常，没有出现完全堵死现象。

4. 购买产品前可拨打4008083500联系我公司技术支持沟通，评估毛细管毛细管清洗成功率。

五、安全防护注意事项：

在处理本套件中提供的缓冲液时，请遵循良好的实验室规范并佩戴适当的防护设备，包括手套、护目镜和外套。如果身体部位与缓冲液接触，请立即用大量水清洗。如果需要，寻求医疗帮助。

五、准备材料：

用去离子水或超纯水将两个旧POP胶空瓶清洗干净；并将其灌满备用。

六、3130操作流程：

1. 启动电脑和仪器，启动3130软件。

2. 将测序仪上放置的阳极缓冲液杯、Water槽、Waste槽和Buffer槽中的原有液体清空，然后将空槽放回原处，以容纳清洗毛细管时产生的废液。

3. 将事先准备好装的8ml去离子水的瓶子装入测序仪上原本安装POP胶瓶的位置。

4. 从“Wizards”主下拉菜单选择“Replenish Polymer Wizard”程序：

Step1界面，选择“Different Lot”，点击下一步；

Step2界面，Polymer lot number栏填入任意数字，Polymer expiration date栏填入任意日期，点击下一步；

Step3界面，点击“Close Valve”，点击下一步；

Step4界面，点击“Prime”，等待30秒，点击下一步；

Step5界面，选择“No,All bubbles are gone”，点击下一步；

Step6界面，选择“No,All bubbles are gone”，点击下一步；

Step7界面，点击“Finish”，直接退出。

注意：如果在操作“Replenish Polymer Wizard”程序过程中出现错误消息提示，点击“Clear Errors”并继续。

5. 从左侧导航菜单中找到“Manual Control”并点击进入手动控制界面

l 从Send Defined Command For左侧的下拉菜单中选择“Buffer Valve”，在Command Name栏下拉选择“Close/Open buffer valve”，选择“Open”后，点击“Send Command”，等待Comments状态栏反馈ok；

l 从Send Defined Command For左侧的下拉菜单中选择“Polymer delivery pump”

在Command Name栏下拉选择“Home Piston”，点击“Send Command”，等待Comments状态栏反馈ok。

l 在Command Name栏下拉选择“Move Piston Down”，在Value栏输入37500，点击“Send Command”，等待Comments状态栏反馈ok；

★★★ 将上述第5步骤的全部操作再重复执行五次。★★★

第5步骤描述的操作再重复执行到第四次并完成时，需打开舱门观察胶泵中是否有气泡。无气泡，继续执行第五次重复操作后跳至第6步骤。若有气泡，执行第五次重复操作后打开舱门观察胶泵：

l 气泡还在胶泵中，则没有进入毛细管；执行下一步操作,开始第6步骤。

l 气泡不在胶泵中，请将第5步骤的操作，再重复执行一次（第六次），将进入毛细管中的气泡排出去，避免气泡导致毛细管部分中空现象出现；完成第六次重复执行后,开始第6步骤。

6. 从Send Defined Command For栏左侧下拉菜单中选择“Oven”。在Command Name栏选择“Turn On/Off oven”(有的软件版本是“Select Oven State”）然后在Value栏选择“On”，点击“Send Command”，等待Comments状态栏反馈ok；在Command Name栏选择“Set oven temperature”将温度设置为“40”℃点击“Send Command”，等待Comments状态栏反馈ok。注意：如果需要更加强烈的修复清洗，温度可以设置在 45℃ 或 50℃。

7. 等待5分钟后打开测序仪前门，取出去离子水瓶子并安装毛细管修复试剂盒的Buffer 1瓶子。

8. 重复操作上述第4~6步骤；完成第6步骤后让仪器待机等待60分钟（不做任何操作）。

9. 打开测序仪前门，取出Buffer 1瓶子并安装毛细管修复试剂盒的Buffer 2瓶子。

10. 重复操作上述第4~6步骤；完成第6步骤后让仪器待机等待5分钟（不做任何操作）。

11. 打开测序仪前门，取出Buffer 2瓶子并安装毛细管修复试剂盒的Buffer 3瓶子。

12. 重复操作上述第4~6步骤；完成第6步骤后让仪器待机等待30分钟（不做任何操作）。

13. 打开测序仪前门，取出Buffer 3瓶子并安装毛细管修复试剂盒的Buffer 4瓶子。

14. 重复操作上述第4~6步骤；完成第6步骤后让仪器待机等待5分钟（不做任何操作）。

15. 打开测序仪前门，取出Buffer 4瓶子并安装一瓶新的8ml去离子水瓶子。

16. 重复操作上述第4~6步骤；3130毛细管再生修复操作步骤已完成。

17. 打开测序仪前门， 取出8ml去离子水瓶子并安装一瓶新的POP胶，从“Wizards”主下拉菜单选择“Replenish polymer wizard”补充聚合物流程向导按正常上胶操作流程执行，排除胶泵与毛细管中的去离子让胶完全进入并填满毛细管，如果有气泡需执行排气泡流程，

18. 清理阳极缓冲液杯、Water槽、Waste槽和Buffer槽中的废液，然后装入新的Water和1x Buffer。

19. 上样本板重复运行3-5run，每个run运行完成后对比前后数据结果会发现，随机出现的杂峰等会随着运行次数的增加而逐步减少和减弱；若吴现成的样本板可空跑甲酰胺。

注意：

u 因运输途中的晃动瓶里的试剂有可能会产生气泡，需冷藏静置等气泡消失后再上机运行。

u 完成全部毛细管再生清洗流程需要大约7个小时。

u 保留一板样本，用于检验清洗前、后跑出的实验数据进行比对，验证再生试剂修复效果。

u 修复完成后的毛细管与新的毛细管类似，需要运行3-5个run后毛细管才能达到最佳性能。

u 修复完成后的毛细管还可以执行“空间定位”和“光谱校正”以获得最佳结果。

u 如果毛细管宽峰、拖尾问题顽固，需要更彻底的修复，可以重复清洗多次。

u 由于再生过程中会清除毛细管接头连接区域的残渣，毛细管与胶泵的连接处可能会出现松动的情况，需要动手重新调整拧紧毛细管接头。

危害防护标识及危险说明：

H360 - 吞咽可能对生育能力或胎儿造成伤害。

H351 - 吞咽怀疑会致癌。

 危险物质安全控制法：未列入

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures

          仅供研究使用。不用于诊断程序                                                                                                                                                                                                                                              万莱福生物技术（深圳）有限责任公司出品